Исследование антител к белкам вируса гепатита C методом иммуноблоттинга проводится при положительном или сомнительном результате исследования на антитела к вирусу гепатита C в скрининговой тест-системе, для выявления антител к отдельным антигенам вируса гепатита C.

Геном вируса гепатита C – одиночная цепь РНК, разделён на зоны, в которых заключена информация о структурных и неструктурных белках вируса. Структурная зона представлена следующими участками: core – кодируют ядерные белки; E1 и E2 (NS1 - у некоторых авторов) — отвечают за синтез оболочечных белков вируса. Неструктурная зона также разделена на участки: NS2, NS3, NS4a, NS4b, NS5a, NS5b, которые содержат информацию о ферментах, определяющих жизнедеятельность вируса. К настоящему времени обнаружено 6 вариантов генотипа и большое количество субтипов вируса. В одной географической зоне могут доминировать несколько генотипов.

Иммуноблоттинг - высокоспецифичный и высокочувствительный референтный метод. Метод основан на постановке иммуноферментного анализа на нитроцеллюлозных мембранах, на которые в виде отдельных полос нанесены специфические для вируса гепатита С белки: ядерные антигены — core1, core2; неструктурные антигены — NS3, NS4, NS5. При наличии в исследуемом образце антител к вирусу гепатита C они связываются с антигенами иммуносорбента; образовавшиеся комплексы антиген-антитело связываются с конъюгатом и выявляются по цветной реакции с хромогеном, которая приводит к появлению в соответствующих зонах стрипа окрашенных полос; интенсивность окрашивания прямо пропорциональна уровню антител в образце. Регистрация результатов исследования проводится визуально или на ридере путём сравнения интенсивности окраски антигенных линий с интенсивностью окраски контрольных линий.

Положительный или сомнительный результат исследования на антитела к вирусу гепатита С при скрининге.

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берётся в вакуумную пробирку с активатором свертывания и сепарирующим гелем (красная/желтая крышка), сразу после заполнения пробирку необходимо перемешать, поворачивая на 180º 5-6 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время. Затем пробирке следует дать постоять 20-30 минут при комнатной температуре (для образования сгустка). Отцентрифугировать при 3500 об/мин (2000g) – 10 минут, не позднее, чем через 2 часа после взятия. Пробирку передать в лабораторию в день взятия. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Материал для исследования: сыворотка крови

Метод исследования: иммуноблоттинг

Единицы измерения: тест качественный

При получении положительного результата в иммуноблоттинге, выдается ответ: иммуноблот - результат «положительный» с обязательным указанием в коментарии к каким белкам вируса (core, NS3, NS4, NS5) выявлены антитела.

При получении отрицательного результата в иммуноблоттинге, выдается ответ: иммуноблот - результат «отрицательный». Это означает или раннюю стадию заболевания или вероятность каких-либо неспецифических влияний компонентов сыворотки крови обследуемого (например, присутствие лекарственных препаратов, онкологические заболевания, хронические инфекционные или инфекционно-аллергические заболевания).

При получении неопределённого (сомнительного) результата в иммуноблоттинге, выдается ответ : иммуноблот - результат «сомнительный» с обязательным указанием в коментарии к какому белку вируса выявлены антитела. В данном случае рекомендуется повторить исследование через 2-3 недели.

Дополнительно рекомендуемые исследования: E281 Антитела к вирусу гепатита C (anti-HCV) суммарные (ИХЛА); E290 Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита C (anti-HCV confirmatory).

Гепатит D

Клинические рекомендации – Хронический вирусный гепатит C –2021-2022-2023 (14.02.2022) – Утверждены Минздравом РФ. 2021: 49 с.

Kanwal F., Lok A.S., El-Serag H.B. CDC and USPSTF 2012 recommendations for screening for hepatitis C virus infection: overview and take-home messages. /Clin Gastroenterol Hepatol. 2013 Mar; 11(3):200-203.

В клиниках партнеров BION или в процедурном кабинете