Дифференциальная диагностика первичной и вторичной краснухи у беременных (при положительном тесте на IgM- и IgG-антитела)

Авидность IgG-антител к вирусу краснухи - исследование используется для подтверждения или исключения недавнего первичного инфицирования вирусом краснухи, дифференциальной диагностики первичного инфицирования, перенесенной инфекции, вакцинации и реинфекции, оценки риска передачи инфекции плоду или новорождённому и развития связанным с вирусом осложнений.

Подтверждение или исключение факта недавнего первичного инфицирования особенно важно при обследовании беременных женщин, поскольку именно при остром первичном инфицировании во время беременности высок риск вертикальной передачи инфекции и развития патологии плода. В основе теста на авидность IgG-антител лежит метод дифференциации высоко- и низкоавидных антител. Авидность IgG-антител в пробе оценивают с помощью расчетного показателя – индекса авидности.

Выявление в сыворотке крови одновременно IgG- и IgM-антител к вирусу крваснухи может быть свидетельством недавнего первичного инфицирования, поскольку срок исчезновения IgM-антител обычно составляет около 2 месяцев от начала инфекционного процесса. Но период циркуляции IgM-антител может значительно варьировать в зависимости от возбудителя и индивидуальных особенностей иммунного ответа организма. IgM-антитела могут появляться и при реинфекции. Таким образом, их присутствие в крови беременной женщины не всегда является подтверждением первичного инфицирования в период беременности. Специфичность даже лучших коммерческих тест-систем для обнаружения IgM-антител низкая, в некоторых ситуациях возможны неспецифические ложноположительные результаты (такие интерференции нередки среди беременных). Для уточнения срока давности развития инфекционного процесса проводят определение авидности вирусоспецифических IgG-антител. Низкоавидные IgG-антитела к Rubella virus выявляются до 25-го дня с момента появления сыпи при первичной краснухе и отсутствуют при реинфекции. При внутриутробной краснушной инфекции следует учитывать, что вирусоспецифические IgM-антитела продуцируются через 10-13 недель гестации и сохраняются до 8-12 месяцев после рождения. Одновременно выявляются специфические IgG-антитела к R.virus, полученные от матери, постепенно замещающиеся собственными IgG-антителами ребенка через несколько месяцев после рождения. .

Определение специфических антител (IgM, IgG) традиционно играет одну из главных ролей не только в лабораторной диагностике приобретенной краснухи, но и при скрининговом обследовании с целью определения и оценки постинфекционного, поствакцинального иммунитета к вирусу краснухи (в том числе у женщин при подготовке к беременности и беременных). Обнаружение IgM-антител к Rubella virus свидетельствует о первичном инфицировании или реинфекции. Определение IgG-антител к Rubella virus целесообразно проводить в количественном формате в динамике: тестирование парных образцов сыворотки крови, исследованных одновременно в одном опыте (при условии, что второй образец получен не менее чем через 10 дней после первого, собранного в острой фазе заболевания). При этом лабораторным подтверждением первичного инфицирования служит определение перехода отрицательного результата в положительный или четырехкратного и более увеличения концентрации вирусоспецифических IgG-антител во втором образце. Повышение уровня IgG-антител к Rubella virus при отсутствии выраженной клинической картины заболевания может являться доказательством развития реинфекции (особенно у ранее вакцинированных). Для уточнения срока давности развития инфекционного процесса, дифференциации первичной и вторичной краснухи проводится определение авидности вирусоспецифических IgG-антител. В начале формирования иммунного ответа IgG-антитела являются низкоавидными и характеризуются низкой константой связывания с антигеном. В дальнейшем образуются специфические антитела, сохраняющие прочную связь с антигеном, и авидность возрастает. При обнаружении высокоавидных IgG-антител к R. virus можно предполагать, что инфекционный процесс вышел за пределы ранней стадии.

При применении только косвенных методов лабораторной диагностики приобретенной краснухи (определение вирусоспецифических IgM-антител, IgG-антител и авидности IgG-антител) нередко возникает затруднение в интерпретации результатов, которое может быть обусловлено персистированием в крови IgM-антител к Rubella virus в течение нескольких месяцев как после первичного инфицирования или реинфекции, так и вакцинации; наличием перекрестных реакций при выявлении вирусоспецифических IgM-антител, связанных с содержанием ревматоидного фактора или IgM-антителами к Pri- mate erythroparvovirus 1, ВЭБ и др.; а также возможностью парадоксально раннего появления вирусоспецифических IgG-антител.

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берётся в вакуумную пробирку с активатором свертывания и сепарирующим гелем (красная/желтая крышка), сразу после заполнения пробирку необходимо перемешать, поворачивая на 180º 5-6 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время. Затем пробирке следует дать постоять 20-30 минут при комнатной температуре (для образования сгустка). Отцентрифугировать при 3500 об/мин (2000g) – 10 минут, не позднее, чем через 2 часа после взятия. Пробирку передать в лабораторию в день взятия. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Материал для исследования: сыворотка крови

Метод исследования: иммуноферментный анализ (ИФА)

Единицы измерения: %

индекс авидности менее 45% – низкая авидность (низкоавидные антитела)

индекс авидности 45-50% - серая зона

индекс авидности более 50% – высокая авидность (высокоавидные антитела)

Низкий индекс авидности означает присутствие низкоавидных антител (нельзя исключить первичное инфицирование).

Серая зона означает неопределенный результат, рекомендуется повторить исследование через 14 дней.

Высокий индекс авидности означает присутствие высокоавидных антител (указывает на давнюю инфекцию).

Для исключения первичной инфекции у беременных при получении положительного результата исследования на IgG-антитела к Rubella virus, эти образцы должны быть протестированы на наличие IgM-антител к Rubella virus и проведено определение авидности IgG-антител.

Дополнительно рекомендуемые исследования: E350 Антитела к вирусу краснухи IgM; E355 Антитела к вирусу краснухи IgG; G065 Вирус краснухи, обнаружение РНК.

Корь

Домонова Э.А. Краснуха. // Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Под ред. Акимкина В.Г., Твороговой М.Г. - Москва. ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 2020: 280-286.

Домонова Э.А., Шипулина О.Ю. Вирус краснухи // Молекулярная диагностика инфекционных болезней. Под ред. Покровского В.И., Твороговой М.Г., Шипулина Г.А. М.: Рипол Классик, 2018:477-485.

Домонова Э.А., Шипулина О.Ю., Сильвейстрова О.Ю., Лаптева Е.Б. Диагностические возможности выявления маркеров краснухи на разных стадиях развития инфекционного процесса // Справочник заведующего КДЛ. 2017. (5):23-37.

Winter A.K., Moss W.J. Rubella. /Lancet. 2022 Apr 2; 399(10332): 1336-1346.

Hamkar R., Jalilvand S., Mokhtari-Azad T., et al. Assessment of IgM enzyme immunoassay and IgG avidity assay for distinguishing between primary and secondary immune response to rubella vaccine. /J Virol Methods. 2005 Dec; 130(1-2): 59-65.

В клиниках партнеров BION или в процедурном кабинете