Антитела к Entamoeba histolytica IgG – дополнительный тест при диагностике амёбиаза. IgG-антитела обнаруживают у 75% больных с кишечным амебиазом и 95% пациентов с внекишечным амебиазом.

Амебиаз - протозойная инвазия человека, сопровождающаяся поражением толстой кишки и способная к генерализации. Возбудитель амебиаза - Entamoeba histolytica (дизентерийная амёба). Амёбы существуют в двух формах: цистах (статическая форма) и трофозоитах (вегетативная форма). В отличие от других видов амёб у дизентерийной амёбы выделяют четыре формы вегетативной стадии: тканевую, Е. histolytica forma magna (эритрофаг), просветную и предцистную. С особенностями жизненного цикла возбудителя может быть связано бессимптомное носительство, при котором цисты и просветные формы амеб могут длительное время обитать в кишечнике как комменсалы, и манифестные формы заболеваний (инвазивный амебиаз), характеризующиеся язвенным поражением кишечника (кишечный амебиаз) и, в осложненных случаях, – формированием абсцессов печени, мозга и других органов (внекишечный амебиаз).

Наиболее частым следствием инфицирования является бессимптомное носительство. Кишечный амебиаз регистрируется в различных регионах мира, но наибольшую распространенность имеет в странах с тропическим и субтропическим климатом. Источником заболевания является больной человек или носитель, выделяющий цисты амеб с фекалиями. Цисты обладают высокой устойчивостью во внешней среде, что определяет водный, алиментарный и контактно-бытовой пути передачи возбудителя. Особенностью амебиаза является длительный инкубационный период (20-40 дней, в некоторых случаях до 3 месяцев). Механизм передачи фекально-оральный. Факторами передачи амёбиаза могут быть почва, сточные воды, вода открытых водоемов, предметы бытовой и производственной обстановки, фрукты, овощи, пищевые продукты. Естественная восприимчивость людей к амёбиазу высокая, в том числе и к реинфекции.

Около 480 млн. людей в мире являются носителями Е. histolytica, из них у 48 млн. (10%) развиваются кишечный амёбиаз и его внекишечные формы. Болезнь распространена повсеместно с преобладанием заболеваемости в развивающихся странах субтропической и тропической зон. Заболеваемость характеризуется весенне-летней сезонностью. Согласно классификации ВОЗ выделяют бессимптомный и манифестный амёбиаз, в том числе кишечный (амёбная дизентерия и дизентерийный амёбный колит) и внекишечный (печеночный: острый негнойный и абсцесс печени; легочный и другие внекишечные поражения).

Диагноз амебиаза устанавливают на основании данных эпидемиологического анамнеза, клинической картины заболевания и результатов лабораторного исследования. Применение инструментальных методов исследований является обязательным для исключения внекишечных осложнений амебиаза (наиболее частая форма – амебные абсцессы печени). Лабораторная диагностика амебиаза включает в себя визуальное обнаружение E. histolytica с использованием микроскопии, выявление ДНК E. histolytica методом ПЦР, выявление антител к E. histolytica.

Наиболее распространенным методом диагностики кишечного амебиаза является микроскопия образцов фекалий, которая позволяет выявить различные морфологические формы патогена. Микроскопическим подтверждением амебной этиологии поражения кишечника является обнаружение тканевых (вегетативных) форм амебы с фагоцитированными эритроцитами. Микроскопическое исследование рекомендуется проводить в два этапа. На первом этапе исследуют нативные или окрашенные препараты фекалий для выявления вегетативных форм возбудителя. При отрицательных результатах исследования необходимо провести предварительное обогащение образца, которое позволяет выявить цисты амеб. Ложноположительные результаты исследования могут быть связаны с наличием в исследуемых образцах непатогенных видов амеб, прежде всего E. Dispar. Наиболее целесообразно применение метода микроскопии прии проведении исследований в регионах с высокой распространенностью амебиаза (тропические и субтропические зоны), при наличии квалифицированных специалистов, имеющих опыт микроскопической диагностики амебиаза. При кишечном амебиазе безусловным подтверждением амебной этиологии поражения кишечника является обнаружение вегетативных форм амеб, фагоцитирующих эритроциты, в окрашенных или нативных препаратах фекалий без их обогащения. Диагностическая чувствительность такого исследования у пациентов с подострым и хроническим течением заболевания бывает невысокой. Более высокая чувствительность достигается при использовании методов обогащения фекалий, однако они позволяют проводить концентрирование только цист амеб. Выявление цист имеет меньшее диагностическое значение и не позволяет подтвердить этиологию острых форм язвенного поражения кишечника.

Обнаружение ДНК E. histolytica с использованием метода ПЦР не позволяют дифференцировать острое заболевание от носительства просветных форм E. histolytica на фоне острой кишечной инфекции другой этиологии. Обнаружение ДНК E. histolytica методом ПЦР наиболее целесообразно при проведении исследований в неэндемичных районах. При использовании наборов реагентов на основе метода ПЦР обеспечивается возможность дифференцировки морфологически сходных E. histolytica и E. dispar. Однако, данные тесты не позволяют проводить дифференцировку между различными морфологическими формами E. histolytica.

Для выявления специфических антител к E. histolytica наиболее часто используют метод иммуноферментного анализа (ИФА). Опеделение антител в сыворотке крови наиболее информативно при диагностике внекишечных форм амебиаза. Снижение уровня антител наблюдается в течение 6-12 месяцев после завершения эффективного курса терапии. В неэндемичных регионах наиболее эффективно выявление антител к E. histolytica методом ИФА для дифференцировки стадии заболевания и выявления носительства E. histolytica. Определяемый титр антител к E. histolytica как правило, не коррелирует с тяжестью течения заболевания. Наибольшую информативность определение титра антител имеет у пациентов с внекишечными формами амебиаза. IgG-антитела обнаруживают у 75% больных с кишечным амебиазом и 95% пациентов с внекишечным амебиазом. Для постановки диагноза внекишечного амёбиаза, кроме иммуннологического, проводится комплексное инструментальное обследование: УЗИ, рентгенологическое исследование, компьютерная томография и другие методы, которые позволяют определить локализацию, размеры и число абсцессов, а также контролировать результаты лечения.

Подозрение на амёбиаз.

Эпидемиологические исследования.

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берётся в вакуумную пробирку с активатором свертывания и сепарирующим гелем (красная/желтая крышка), сразу после заполнения пробирку необходимо перемешать, поворачивая на 180º 5-6 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время. Затем пробирке следует дать постоять 20-30 минут при комнатной температуре (для образования сгустка). Отцентрифугировать при 3500 об/мин (2000g) – 10 минут, не позднее, чем через 2 часа после взятия. Пробирку передать в лабораторию в день взятия. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Материал для исследования: сыворотка крови

Метод исследования: иммуноферментный анализ (ИФА)

Единицы измерения: Ед (коэффициента позитивности)

Результат оценивается в единицах коэффициента позитивности: S/CO (signal/cutoff)

< 0,9 — отрицательный

0,9-1,0 — сомнительный

≥ 1,0 — положительный

Положительный результат исследования свидетельствует о текущем или имевшем место в прошлом амёбиазе.

Отрицательный результат исследования может быть при инвазии или у серонегативных пациентов.

При получении сомнительного результата исследование необходимо повторить через 2-3 недели и провести обследование пациента.

Дополнительно рекомендуемые исследования: C041 Исследование кала на простейшие и яйца гельминтов; C043 Исследование кала на простейшие и яйца гельминтов системой PARASEP; C045 Исследование кала на простейшие; G310 Скрининговое ПЦР-исследование на возбудителей кишечных паразитозов (лямблиоза, амебиаза, бластоцистной инвазии, криптоспоридиоза, изоспороза) Прото-скрин.

Подколзин А.Т., Сакалкина Е.В. Амебиаз. // Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Под ред. Акимкина В.Г., Твороговой М.Г. - Москва. ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 2020: 201-203.

Сергиев В.П., Лебедева М.Н., Фролова А.А, и др. Паразитологические исследования./ В Меньшиков В.В., ред. Методики клинических лабораторных исследований: Справочное пособие. Том 3. Клиническая микробиология. Бактериологические исследования. Микологические исследования. Паразитологические исследования. Инфекционная иммунодиагностика. Молекулярная диагностика инфекционных заболеваний.// М.: Лабора; 2009: 477-515.

Schulz T.F., Kollaritsch H., Hengster P., et al. Molecular weight analysis of Entamoeba histolytica antigens recognized by IgG and IgM antibodies in the sera of patients with amoebiasis. /Trop Med Parasitol. 1987 Sep; 38(3):149-152.

Sengupta K., Ghosh P.K., Ganguly S., et al. Characterization of entamoeba histolytica antigens in circulating immune complexes in sera of patients with amoebiasis. /J Health Popul Nutr. 2002 Sep; 20(3):215-222.

В клиниках партнеров BION или в процедурном кабинете