Антитела к грибам Aspergillus IgG - выявляются в сыворотке крови большинства инфицированных аспергиллами и практически у всех больных, в легких которых при рентгенологическом исследовании обнаружен грибковый «шар» (около 90% случаев).

Аспергиллёз - группа заболеваний, вызванных грибами рода Aspergillus, относящихся к отделу Ascomycota. Среди более двухсот известных видов аспергилл, заболевания (аспергиллезы) у людей способны вызывать менее двух десятков видов, среди которых: A. fumigatus, A. Flavus, A. niger, A. terreus, A. alliaceus, A. oryzae, A. versicolor, A. candidus, A. Clavatus, A. flavipes, A. glaucus, A. japonicus, A. nidulans, A. sydowii, A. ustus и др. Наиболее часто заболевания вызывают A. fumigatus, A. flavus и A. niger.

Аспергиллы – одни из самых распространенных грибов в мире. Они обитают в почве, органических остатках, птичьем помете, воздухе и пыли, системах вентиляции и водоснабжения, описана контаминация медицинских инструментов (ИВЛ, небулайзеры и пр.). Основной путь заражения человека – аэрогенный, реже – алиментарный или травматический. Инфицирование обычно происходит при вдыхании пыли, содержащей конидии Aspergillus spp. Вдыхание конидий Aspergillus spp. у здорового человека очень редко ведет к развитию инфекции, однако у людей с иммунодефицитами аспергиллы являются распространенной причиной инфекций инвазивного типа со значительным уровнем смертности. От человека к человеку ни одна форма аспергиллеза не передается. Полной и достоверной статистики по частоте выявления аспергиллеза в настоящее время нет, так как значительное число случаев заболевания не диагностируется.

Диагноз аллергического бронхопульмонального аспергиллёза ставят, если при обследовании выявляют сочетание следующих признаков (присутствуют более чем у 90% больных): приступы бронхиальной астмы; число эозинофилов в периферической крови более 1,0 х 109/л (часто более 3,0 х 109/л); быстро исчезающие или длительно сохраняющиеся ограниченные затемнения на рентгенограммах грудной клетки; бронхоэктазы в области крупных бронхов в отсутствие изменений в более мелких при компьютерной томографии или бронхографии; положительные кожные пробы с антигенами Aspergillus; повышение уровня общего IgE в сыворотке крови (обычно более 1000 МЕ/мл).

Лабораторная диагностика аспергиллёза включает в себя культуральное исследование, микроскопическое исследование, определение галактоманнана (антигена Aspergillus spp.), обнаружение ДНК аспергилл методом ПЦР, выявление специфических антител.

Культуральное (микологическое) исследование для обнаружения грибов рода Aspergillus широко используют в клинической практике ввиду его относительной простоты и низкой стоимости. Для культурального исследования проводят посев крови, БАЛ, мокроты, биопсийного материала. Определение вида возбудителя аспергиллеза имеет важное клиническое значение в связи с их различной чувствительностью к антимикотикам. Идентификация наиболее клинически значимых видов (A. fumigatus, A. flavus, A. niger и A. terreus) обычно не вызывает затруднений у специалистов практических лабораторий, однако идентифицировать вид редко встречающихся возбудителей аспергиллеза значительно сложнее, главным образом из-за отсутствия опыта работы с такими грибами. Культуральное исследование имеет довольно низкую чувствительность: среди пациентов, у которых были обнаружены ДНК аспергилл методом ПЦР, только 25-50% имели положительный результат культурального исследования.

Определение антигена Aspergillus (галактоманнана) методом ИФА в сыворотке крови, БАЛ, СМЖ – распространенный на сегодняшний день метод диагностики аспергиллеза. Чувствительность определения галактоманнана в сыворотке крови при доказанном инвазивном аспергиллезе составляет 71%, специфичность – 89%. Частота ложноположительных результатов при использовании данного теста у больных без инвазивного аспергиллеза составляет до 18%, поэтому для повышения диагностической специфичности рекомендуется проводить повторное исследование (исследование парных сывороток).

Выявление специфических антител в сыворотке крови используется в основном для диагностики аллергического бронхолегочного аспергилллеза и аспергилломы. Для диагностики острого инвазивного аспергиллеза исследование используется редко, в связи с нарушением продукции иммуноглобулинов у пациентов с тяжелыми иммунодефицитами. Антитела класса IgG к антигенам Aspergillus выявляются в сыворотке крови большинства инфицированных и практически у всех больных, в легких которых при рентгенологическом исследовании обнаружен грибковый «шар» (около 90% случаев). Тест имеет 100% специфичность. При эффективном лечении антитела класса IgG к антигенам Aspergillus исчезают из сыворотки крови в течение 1-2 месяцев.

Диагностика аспергиллёза (в комплексе с общеклиническими, микробиологическими и ПЦР-исследованиями).

Контроль эффективности лечения аспергиллёза.

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берётся в вакуумную пробирку с активатором свертывания и сепарирующим гелем (красная/желтая крышка), сразу после заполнения пробирку необходимо перемешать, поворачивая на 180º 5-6 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время. Затем пробирке следует дать постоять 20-30 минут при комнатной температуре (для образования сгустка). Отцентрифугировать при 3500 об/мин (2000g) – 10 минут, не позднее, чем через 2 часа после взятия. Пробирку передать в лабораторию в день взятия. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Материал для исследования: сыворотка крови

Метод исследования: иммуноферментный анализ (ИФА)

Единицы измерения: титр

Положительный результат исследования (титр ≥1/100), при наличии клинической картины заболевания, свидетельствует о наличии аспергиллёза.

Отрицательный результат исследования (титр <1/100) может быть при отсутствии аспергиллёза или при недетектируемом уровне антител у лиц с иммуносупрессией.

Дополнительно рекомендуемые исследования: E620 Антитела к грибам Aspergillus IgG; G248 Aspergillus spp., обнаружение ДНК.

Комплексные серологические исследования

Скачкова Т.С., Матосова С.В., Шипулина О.Ю. Аспергиллез. // Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Под ред. Акимкина В.Г., Твороговой М.Г. - Москва. ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 2020: 215-220.

Latge J.P. Aspergillus fumigatus and aspergillosis. /Clin Microbiol Rev. 1999 Apr; 12(2):310-350.

Schmitt H.J., Blrvins A., Sobeck K., Armstrong D. Aspergillus species from hospital air and from patients. /Mycoses. 1990 Nov-Dec; 33(11-12):539-541.

В клиниках партнеров BION или в процедурном кабинете