Мультиплексное ПЦР-исследование, используемое для выявления и типирования ДНК/РНК возбудителей клещевых инфекций (клещевой энцефалит (TBEV), боррелиоз (Borrelia burgdorferi sl), анаплазмоз (Anaplasma phagocytophilum), эрлихиоз (Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia muris). Формат исследования — качественный.

Клещевые инфекции, передающиеся иксодовыми клещами, характеризующиеся большим разнообразием клинических форм. В 30-е годы ХХ века был известен возбудитель клещевого энцефалита. В 1975 году в США в городке Лайм впервые были описаны случаи клещевого боррелиоза у детей с клиническими симптомами ювенильного ревматоидного артрита. Заболевание получило название болезни Лайма. В России болезнь Лайма включена в официальный перечень инфекционных болезней в 1991 году. Далее в 1998 году обнаружены моноцитарные эрлихии, в 2002 году выявлена заражённость клещей возбудителем ещё одного заболевания – анаплазмоза. Для всех этих заболеваний характерны единый механизм передачи, общий резервуар хозяев и переносчиков возбудителя. Было установлено, что клещи рода Ixodes оказались переносчиками многих микроорганизмов.

В данном исследованииопределяются РНК/ДНК возбудителей следующих заболеваний:

Клещевой энцефалит (весенне-летний энцефалит, таёжный энцефалит, русский энцефалит, дальневосточный энцефалит, клещевой энцефаломиелит) – природно-очаговая вирусное инфекционное заболевание с трансмиссивным механизмом передачи возбудителя. Возбудитель вирус клещевого энцефалита: РНК-вирус рода Feavivirus, семейства Fogaviridae, группы Arvoviruses. Известны несколько антигенных вариантов и генотипов вируса.

Болезнь Лайма (иксодовый клещевой боррелиоз, системный клещевой боррелиоз, лайм-боррелиоз) – природно-очаговая инфекционная болезнь с трансмиссивным механизмом передачи возбудителя. Возбудитель – грамотрицательная спирохета комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato семейства Spirochaetaceae рода Borreliae. В. burgdorferi – самая крупная из боррелий.

Эрлихиозы (Ehrlichiosis) – группа острых зоонозных, главным образом трансмиссивных, инфекционных заболеваний, характеризующихся полиморфизмом клинических проявлений. Родовое название Ehrlichia было предложено в 1945 году Ш.Д. Мошковским в честь Пауля Эрлиха. Эрлихии – неподвижные грамотрицательные, риккетсиозоподобные организмы, облигатные внутриклеточные паразиты, размножающиеся бинарным делением, не образующие спор. Этиологическими агентами моноцитарного эрлихиоза считают два вида эрлихий – Е. chaffeensis и Е. Muris.

Гранулоцитарный анаплазмоз человека , называвшийся до 2004 года гранулоцитарным эрлихиозом человека, – это острое лихорадочное заболевание с полиморфной клинической картиной, возбудитель которого передается иксодовыми клещами. Возбудитель гранулоцитарного анаплазмоза Anaplasma phagocytophilum, относится к роду Anaplasma семейства Anaplasmataceae.

Клиническая картина клещевых инфекций имеет много общих черт и неспецифична. Как правило, заболевание манифестирует в виде гриппоподобного синдрома с лихорадкой, головной болью, миалгией и артралгией. Дифференцировать клещевые инфекции между собой и с другими острыми инфекционными заболеваниями на основании только лишь клинической картины заболевания невозможно. Некоторые иксодовые клещи инфицированы сразу двумя (реже тремя) патогенами (коинфекция) и могут приводить к развитию у одного и того же человека сочетанной инфекции. Чаще описаны случаи сочетанного боррелиоза и анаплазмоза. Учитывая эти особенности, при подозрении на клещевую инфекцию необходимо комплексное лабораторное исследование, включающее анализы на все значимые возбудители клещевых инфекций.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это один из методов молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в биологическом материале (в крови) фрагменты генетического материала (ДНК или РНК) возбудителя инфекции. Высокая специфичность (60-85%) метода особенно важна для дифференциальной диагностики клещевых инфекций. Известно, что, например, серологические тесты на клещевые инфекции часто дают ложноположительный результат из-за наличия перекрестных реакций, обусловленных общими антигенными свойствами указанных микроорганизмов.

Диагностика клещевого энцефалита, боррелиоза, моноцитарного эрлихиоза и анаплазмоза.

Дифференциальная диагностика клещевых инфекций.

Наличии у пациента гриппоподобного синдрома (лихорадки, головной боли, миалгии и артралгии) в сочетании с указанием на укус клеща.

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берется в вакуумную пробирку с К2ЭДТА или К3ЭДТА (фиолетовая крышка). Для обеспечения правильного соотношения кровь/антикоагулянт пробирка должна заполняться точно до указанного объёма. Сразу после заполнения пробирку необходимо аккуратно перемешать поворачиванием на 180º 8-10 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время взятия материала. Не центрифугировать! Пробирку необходимо отправить в лабораторию в день взятия материала. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Материал для исследования: кровь с ЭДТА

Метод исследования: ПЦР Real time

Единицы измерения: тест качественный

В данном исследовании определяются РНК/ДНК следующих инфекций:

РНК вируса клещевого энцефалита (TBEV)

ДНК боррелии (Borrelia burgdorferi sl)

ДНК эрлихиоза (Ehrlichia Chaffeensis и Ehrlichia muris)

ДНК анаплазмоза (Anaplasma phagocytophilum)

Оценка результатов исследования:

обнаружение РНК/ДНК возбудителя свидетельствует о инфицировании данным возбудителем;

отрицательный результат свидетельствует об отсутствии инфекции (при отрицательном результате серологических маркеров.

Дополнительно рекомендуемые исследования: E390 Антитела к вирусу клещевого энцефалита IgM; E395 Антитела к вирусу клещевого энцефалита IgG; E400 Антитела к возбудителю боррелиоза IgM; E405 Антитела к возбудителю боррелиоза IgG; G350 Возбудители клещевых инфекций (ДНК/РНК) - 4 возбудителя: клещевой энцефалит (TBEV), боррелиоз (Borrelia burgdorferi sl), анаплазмоз (Anaplasma phagocytophilum), эрлихиоз (Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris).

Гинцбург А.Л., Злобин В.Н., ред. Природно-очаговые инфекции, передающиеся иксодовыми клещами. /М., 2013 – 464 с.

Korenberg E.I. Problems in the study and prophylaxis of mixed infections transmitted by ixodid ticks. /Int J Med Microbiol. 2004 Apr:293 Suppl 37:80-85.

Taba P., Schmutzhard E., Forsberg P., et al. EAN consensus review on prevention, diagnosis and management of tick-borne encephalitis. /Eur J Neurol. 2017 Oct; 24(10):1214-1261.

Vilibic-Cavlec T., Barbic L., et al. [TICK-BORNE ENCEPHALITIS VIRUS: EPIDEMIOLOGICAL AND CLINICAL PICTURE, DIAGNOSIS AND PREVENTION]. /Acta Med Croatica. 2014 Dec; 68(4-5):393-404.

В клиниках партнеров BION или в процедурном кабинете