Мультиплексное ПЦР-исследование, используемое для выявления и типирования ДНК возбудителей грибковых инфекций рода Candida, Malassezia, Saccharomyces и Debaryomyces методом ПЦР Real time в крови. Формат исследования — количественный.

Заболевания человека, вызываемые различными видами патогенных и условно-патогенных грибов, являются важной проблемой здравоохранения. Данные ретроспективных исследований свидетельствуют, что подавляющее большинство летальных случаев среди микозов приходится на пациентов с иммунодефицитными состояниями различного генеза. Широкое распространение ВИЧ-инфекции, применение иммуносупрессивной терапии, проведение инвазивных диагностических процедур привело к увеличению числа пациентов с высоким риском микозов. Важнейшим условием успешного лечения микозов является ранняя и интенсивная антифунгальная терапия. В связи с чем существует потребность в совершенствовании системы ранней диагностики микозов.

Основными представителями дрожжевых грибов являются грибы родов Сandida, Saccharomyces, Debaryomyces и Malassezia. Род Сandida включает более 100 видов, из них клиническое значение имеют около 20. Патогенными для человека являются С. albicans, C. tropicalis, C. krusei, C. lusitaniae, C. kefyr, C. glabrata, C. guilliermondii, C. parapsilosis, C. famata и др. Из грибов, относящихся к роду Saccharomyces, инфекционную патологию вызывает вид cerevisiae. Сахаромицеты являются условно-патогенными микроорганизмами, в норме их выделяют со слизистой оболочки ротовой полости, влагалища, обнаруживают в кале, мокроте и т. д. В настоящее время известно около 14 видов грибов рода Malassezia. Грибы рода Malassezia относятся к труднокультивируемым, требовательны к условиям сохранения культуры, обладают высокой способностью к видообразованию, что значительно затрудняет их изучение и диагностику.

Для подтверждения наличия кандидозной инфекции необходима не только качественная, но и количественная оценка дрожжевых грибов, проводимая в сопоставлении с клинической симптоматикой, с учетом наличия фоновых заболеваний, микст-инфекции.

Установление этиологической роли конкретного возбудителя при микозах чаще всего является непростой задачей, обусловленной определенными ограничениями стандартных методов их диагностики. С помощью методов лабораторной диагностики, направленных на выделение чистой культуры возбудителей микозов, возможна их видовая идентификация не ранее, чем через 1-3 недели. Микроскопическое исследование биологического материала, как правило, позволяет лишь предположить природу заболевания, но не определить возбудитель до вида. В настоящее время все большее применение в лабораторной диагностике микозов находят молекулярно-биологические методы определения ДНК патогена, позволяющие определить возбудителя до вида с высокой чувствительностью и специфичностью. На практике особое распространение получил метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Подозрение на кандидоз, кандидемию, кандидурию или кандидоносительство.

Мониторинг динамики колонизации дрожжевыми грибами ран, катетеров.

Обследование пациентов из групп риска.

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берется в вакуумную пробирку с К2ЭДТА или К3ЭДТА (фиолетовая крышка). Для обеспечения правильного соотношения кровь/антикоагулянт пробирка должна заполняться точно до указанного объёма. Сразу после заполнения пробирку необходимо аккуратно перемешать поворачиванием на 180º 8-10 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время взятия материала. Не центрифугировать! Пробирку необходимо отправить в лабораторию в день взятия материала. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Материал для исследования: кровь с ЭДТА

Метод исследования: ПЦР Real time

Единицы измерения: Lg (копий/образец)

В данном исследовании выявляются и типируются следующие возбудители грибковых инфекций:

Meyerozyma guilliermondii (C. guilliermondii);

Candida albicans;

Pichia kudriavzevii (C. krusei);

Saccharomyces cerevisiae;

Candida auris;

Candida tropicalis;

Clavispora lusitaniae (C. lusitaniae);

Debaryomyces hansenii (C. famata);

Candida dubliniensis;

Candida glabrata;

Candida parapsilosis;

Kluyveromyces marxianus (C. kefyr);

Malassezia spp.;

Malassezia furfur.

Исследование выполняется в полуколичественном формате. Результат исследования выражается десятичным логарифмом количества копий ДНК-мишени в образце.

В тест-систему включен контроль взятия материала (КВМ). При значениях КВМ меньше 3,0 Lg (копий/образец) - недостаточное количество материала и рекомендуется повторное взятие материала для исследования.

Трактовка результатов исследования:

обнаружено (в анализируемом образце обнаружены фрагменты ДНК, специфичные для исследуемого микроорганизма); К результату добавляется комментарий с указанием уровня выявленной бактериальной ДНК в lg (копий/образец);

не обнаружено (в анализируемом образце не обнаружено фрагментов ДНК, специфичных для исследуемых микозов, или концентрация возбудителей в образце ниже границы чувствительности метода).

Дополнительно рекомендуемые исследования: 253 МикозоСкрин (выявление и типирование возбудителей грибковых инфекций рода Candida, Malassezia, Saccharomyces и Debaryomyces в мокроте, мазках/соскобах из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогенитального тракта, моче, фекалиях и др.), методом PSR Real Time.

Скачкова Т.С. Микозы. // Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Под ред. Акимкина В.Г., Твороговой М.Г. - Москва. ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 2020: 213-215.

Holzheimer R.G., Dralle H. Management of mycoses in surgical patients -- review of the literature. /Eur J Med Res. 2002 May 31; 7(5):200-226.

Kullberg B.J., Oude Lashof A.M.L. Epidemiology of opportunistic invasive mycoses. /Eur J Med Res. 2002 May 31; 7(5):183-191.

В клиниках партнеров BION или в процедурном кабинете