Посев биоматериала (ткань, транссудат, экссудат, отделяемое ран, инфильтратов, абсцессов, пункционные жидкости) на анаэробные бактерии с определением чувствительности к антибиотикам – проводится для диагностики анаэробных инфекций мягких тканей, органов грудной и брюшной полости.
Анаэробная инфекция занимает особое место в структуре хирургических инфекций в связи с исключительной тяжестью течения заболевания, частыми случаями стойкой утраты трудоспособности и высокой летальностью. Под термином «анаэробная инфекция» чаще всего ассоциируют газовую гангрену и столбняк. Между тем инфекции, вызванные анаэробами, распространены очень широко. Анаэробная инфекция делится на клостридиальную анаэробную инфекцию, вызываемую спорообразующими анаэробами (клостридиями) и неклостридиальную анаэробную инфекцию, вызываемую неспорообразующими анаэробными бактериями.
Возбудителями клостридиальной инфекции (газовая гангрена) являются спорообразующие анаэробные бактерии рода Clostridium (чаще всего Clostridium perfringens, Clostridium novyi, Clostridium oedematiens, Clostridium septicum, Clostridium hystolyticum, Clostridium bifermentas). Для развития клостридиальной инфекции в ране необходимы (помимо инфицирования) специальные условия, создающие анаэробную среду: наличие в ране омертвевших тканей, длительная ишемия, наличие слепых карманов, длинный и извитой раневой канал, наложение глухого шва на рану, поздняя хирургическая обработка.
Неклостридиальная анаэробная инфекция вызывается неспорообразующими анаэробными бактериями, которые относятся к условно-патогенным микроорганизмам и являются составной частью нормальной микрофлоры человека. Анаэробы составляют абсолютное большинство нормальной микрофлоры человека. Они обитают в ротовой полости, в желудке, в тонкой кишке, во влагалище у женщин. Возбудителями чаще являются грамположительные кокки (Peptococcus spp., Peptostreptococcus spp,.), грамположительные палочки (Actinomyces spp., Bifidobacterium spp., Lactobacillus spp., Eubacterium spp. и др.), грамотрицательные кокки (Acidaminococcus spp., Megasphaera spp., Veillonella spp.), грамотрицательные палочки (Bacteroides spp., Prevotella spp., Porphyromonas spp., Fusobacterium spp.). В микробных аэробно-анаэробных ассоциациях чаще встречаются неспорообразующие (неклостридиальные) микроорганизмы. Заболевания чаще вызываются собственными, эндогенными бактериями, в отличии от клостридиальной инфекции. Эндогенное инфицирование происходит после различных операций на органах брюшной, грудной полостей и забрюшинного пространства, нижних конечностях (вмешательства на сосудах, ампутации), после пластических и эстетических операций (липосакции, маммопластики и др.), после малоинвазивных вмешательств (артроскопии, лапароскопии и др.), при острых парапроктитах, при операциях на органах малого таза у женщин, у больных сахарным диабетом, при различных травмах (огнестрельных ранениях мышечных массивов, открытых переломах костей таза или длинных трубчатых костей).
Как клостридиальная, так и неклостридиальная инфекции могут протекать с преимущественным поражением подкожной жировой клетчатки (некротический целлюлит), фасций (некротический фасциит), мышц (некротический миозит, мионекроз) или затрагивать все мягкие ткани (целлюлофасциомиозит), вызывая прогрессирующий некротический процесс, тяжёлый сепсис и септический шок. Неспорообразующие анаэробы вызывают самые разнообразные гнойно-воспалительные процессы: в челюстно-лицевой области, легких, печени, поражают мочеполовую систему, опорно-двигательный аппарат, вызывают аппендицит, перитонит, сепсис. Обычно это смешанные инфекции, вызываемые ассоциациями анаэробов с аэробами. Вне зависимости от локализации очага анаэробный процесс имеет ряд общих характерных признаков: неприятный гнилостный запах экссудата, гнилостный характер поражения, газообразование (пузырьки газа из раны, крепитация подкожной клетчатки, газ над уровнем гноя в полости абсцесса), близость развития анаэробного процесса к местам естественного обитания анаэробов. Из анаэробных процессов, имеющих место в хирургической клинике, необходимо отметить особые их формы:
эпифасциальная ползучая флегмона передней брюшной стенки, развивается как осложнение после операций (чаще после аппендэктомии при гангренозно-перфоративном аппендиците);
гангрена Фурнье – анаэробная инфекция мошонки, распространяющаяся на промежность, брюшную стенку, сопровождающаяся некрозом кожи;
анаэробные абсцессы внутренних органов (легких, печени, брюшной полости);
анаэробный перитонит;
анаэробная гангрена легких.
Диагностика анаэробных инфекций проводится с учётом характерной клинической картины заболевания. Большое значение имеет бактериоскопическое исследование окрашенного мазка отделяемого (при этом можно обнаружить анаэробы) и бактериологический посев на анаэробные бактерии. Большое значение при данном исследовании имеет соблюдение правил взятия материала на исследование, так как при контакте с кислородом анаэробы погибают.
Подозрение на анаэробную инфекцию подкожной клетчатки, мягких тканей.
Подозрение на анаэробную инфекцию органов грудной клетки и брюшной полости.
Контроль эффективности лечения.
Взятие биоматериала на исследование должно проводиться до применения антибиотиков и других химиотерапевтических препаратов или после их отмены через 2-3 дня.
Взятие материала на посев производится стерильным тампоном в специальную пробирку с угольной транспортной средой (СПТС), на пробирке помечают Ф.И.О. пациента, дату, время и место взятия материала. До передачи курьеру пробирки с материалом хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС. Время доставки в лабораторию не более 24 часов. Материал на исследование (при заборе объемных материалов) может доставляться и в стерильной пробирке (СП10) ИЛИ ФЛАКОНЕ ДЛЯ АНАЭРОБНЫХ БАКТЕРИЙ (ФК), на КОТОРЫХ указывают Ф.И.О. пациента, дата, время сбора материала, вид материала. При доставке материала в пробирке при температуре +2 - +8ºС, время доставки в лабораторию до 4-х часов. При доставке материала во флаконе при комнатной температуре, время доставки материала до 24 часов
Материал для исследования: ткань, отделяемое ран, пункционные жидкости др.
В результате исследования указывается наличие или отсутствие роста бактерий. При выявлении этиологически значимого возбудителя указывается вид возбудителя, титр (КОЕ/мл или КОЕ/т), и результат определения чувствительности к антибиотикам. Количество и перечень антибактериальных препаратов, к которым определяется чувствительность зависит от вида выделенного микроорганизма.
При оценке результатов микробиологического исследования необходимо учитывать данные бактериоскопии, результаты посева, клиническую симптоматику заболевания и анамнез пациента.
Дополнительно рекомендуемые исследования: H215 Посев на аэробные и факультативно-анаэробные бактерии с определением чувствительности к антибиотикам; H230 Посев на дрожжевые грибы с определением чувствительности к антимикотическим препаратам.
Зубков М.Н. Исследование биоматериалов при инфекциях кожи и подлежащих тканей./ В: Меньшиков В.В (ред). Методики клинических лабораторных исследований: Справочное пособие. Том 3. Клиническая микробиология. Бактериологические исследования. Микологические исследования. Паразитологические исследования. Инфекционная иммунодиагностика. Молекулярные исследования в диагностике инфекционных заболеваний.// М.: Лабора; 2009: 44-51.
Зубков М.Н. Исследование жидкости из стерильных полостей./ В: Меньшиков В.В (ред). Методики клинических лабораторных исследований: Справочное пособие. Том 3. Клиническая микробиология. Бактериологические исследования. Микологические исследования. Паразитологические исследования. Инфекционная иммунодиагностика. Молекулярные исследования в диагностике инфекционных заболеваний.// М.: Лабора; 2009: 26-29.
Anderson C.B., Marr J.J., Ballinger W.F. Anaerobic infections in surgery: clinical review. /Surgery. 1976 Mar; 79(3):313-324.
Berrioz-Torrez S., Umscheid G.A., Bratzler D.W., et al. Centers for Disease Control and Prevention Guideline for the Prevention of Surgical Site Infection, 2017. /JAMA Surg. 2017 Aug 1; 152(8):784-791.
Owens C.D., Stoesse K. Surgical site infections: epidemiology, microbiology and prevention. /J Hosp Infect. 2008 Nov: 70 Suppl 2:3-10.
В клиниках партнеров BION или в процедурном кабинете
